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15553636167
品牌 | 風途 | 產地類別 | 國產 |
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應用領域 | 食品,農業(yè) |
【獸藥名稱】
通用名稱:非洲豬瘟試劑盒價格
漢語拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe
英文名稱:African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit 商品名稱:無
非洲豬瘟試劑盒價格【主要成分與含量】試劑盒中含有如下組分:
試劑盒組分 | 含量 |
陽性對照 | 250μL/管×1管
|
陰性對照 | 250μL/管×1管
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PCR反應液 | 850μL/管×1管
|
萌混合液 | 150μL/管×1管
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說明書 | 1份/盒 |
【作用與用途】 本試劑盒可用于血液產業、脾臟體系、肝臟方案、淋巴結、 樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測深入交流研討。 | 扁桃體資料、腎臟、肌肉關註度、環(huán)境樣品等 |
【用法與判定】
1 用法
1.1待檢樣品釆集橫向協同、保存及運輸
1.1.1樣品釆集
(1) 活豬樣品 無菌采集抗凝血或血清5mL
(2) 病死豬剖檢樣品或屠宰場剖檢樣品 無菌采集死豬的牌、肺敢於挑戰、腎不斷創新、扁桃體、淋巴結提供了遵循、肌 肉等組織樣品參與水平。2?8°C低溫運至實驗室用于檢測。
(3) 病豬污染的周邊環(huán)境 采集與病豬相關場所的糞便服務效率、飼料明確相關要求、污水樣品。2?8C低溫運至 實驗室用于檢測主要抓手。
1.1.2樣品保存 采集的樣品在2?8°C保存應不超過24小時體製,-70°C條件下保存,避免反復凍 融創新科技。
1.1.3樣品運輸泡沫箱加冰袋后密封進行運輸服務延伸。包裝和運輸應符合農業(yè)農村《高致病性動 物病原微生物菌(毒)種或者樣品運輸包裝規(guī)范》和交通運輸門關于危險品運輸管理的有關規(guī)定共創輝煌。
1.2樣品處理
1.2.1血液樣品處理 抗凝血樣品置于離心管中,8000 r/min離心2分鐘取上層血漿進一步,編號待 檢大部分。非抗凝血樣品置于離心管中,待凝固后實際需求,8000 r/min離心2分鐘取200μL上層血清機構,編號待檢。
1.2.2組織樣品處理取適量脾臟交流、肝臟基礎、淋巴結、扁桃體還不大、肌肉等組織高產,置于研磨器或研磨 管中研磨,再加適量生理鹽水混勻發揮作用,制成約10%的組織勻漿良好,8000 r/miii離心2分鐘,取200μL上 清于RNase/DNase-free無菌離心管中銘記囑托,編號備用引領。
1.2.3環(huán)境樣品處理
1.2.3.1糞便、飼料樣品處理方法取適量的糞便示範、飼料放入盛有PBS緩沖液的研磨管中研磨 混勻應用前景,制成約10%的勻漿液.8000 r/min離心2分鐘,取200μL上清于RNase^DNase-free無菌離心 管中製度保障,編號備用預下達。
1.2.3.2污水樣品處理方法 直接取200μL污水進行核酸提取。
1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法進行DNA核酸提取統籌推進。
1.4熒光PCR反應:
1.4.1從試劑盒中取出熒光PCR反應液、酶混合液關鍵技術,室溫融化后了解情況,2000 r/min離心5秒。設被 檢樣品技術研究、陽性對照和陰性對照總和為n,則反應體系配制如下:
試劑 體系
PCR 反應液 17× (n+1) μL
酶混合液 3× (n+1) μL
1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml離心管中加入上述試劑重要的,充分混勻后瞬時離心。按照20μL/ 管分裝量將試劑分裝至熒光PCR反應管姿勢。
1.4.3在上述制備好的熒光PCR反應管中分別加入陰性對照相互融合、陽性對照各5μL、處理好的待測 核酸各5μL,終體積25μL/管綠色化,蓋好熒光PCR反應管蓋不同需求,混勻后瞬時離心發展,轉移到熒光PCR儀器 上。
144將PCR反應管放置在熒光PCR儀樣品槽中支撐作用,在熒光PCR儀上運行以下程序:
步驟 | 條件 | 循環(huán)數 |
UNG處理 | 50 ℃, 2分鐘 | 1 |
預變性 | 95 ℃, 3分鐘 | 1 |
預擴增 | 95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒
| 5 |
PCR擴増 | 95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒
| 40 |
熒光通道選擇FAM,在PCR擴增階段每個循環(huán)的55C時采集熒光信號日漸深入。設置擴增體系為25卩I, 同時要選擇passive reference和quencher為none的模式。(注:若熒光PCR儀(如AB17500)按說明 書中的反應程序設置后因持溫時間短無法運行同時,可將預擴增和PCR擴增條件變更為95C: 5秒 55°C: 30 秒)
2結果判定
2.1試驗有效性判定
陽性對照有典型擴增曲線且Ct值W30.且陰性對照無Cl值或無擴增曲線互動式宣講,線形為直線或輕微 斜線,無指數增模式。則判試驗結果有效自動化。否則,此次試驗視為無效高品質。
2.2樣品判定
2.2.1陽性:樣本檢測結果Ct值W35且有明顯指數增落地生根,判定檢出非洲豬瘟病毒核酸。
2.2.2可疑:樣本檢測結果Ct值在35?38范圍內健康發展。此時應對樣本進行重復檢測有效保障,如果重復實驗 結果Ct值仍在35?38范圍內,有明顯指數增.則判定為陽性長效機製,否則為陰性講實踐。
2.2.3陰性:樣本檢測結果Ct值>38或無Cl值,判定未檢出非洲豬瘟病毒核酸奮戰不懈。
【注意事項】(1)實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書市場開拓,嚴格按照操作步驟執(zhí)行,在操作過 程中對時間大大縮短、試劑體積等準確控制可以獲得好的結果要落實好。
(2) 實驗室應嚴格按照有關規(guī)定分區(qū)管理,依照配液區(qū)-模板提取區(qū)-擴增區(qū)-分析區(qū)順序 進行基因檢測更默契了。各區(qū)間人員先進技術、器材、試劑及空氣流向應有嚴格要求不合理波動。
(3) 核酸提取有關耗村確保潔凈宣講手段、無DNase/RNase,提取過程盡量低溫、快速積極拓展新的領域,完成后進入 下一步實驗或凍保配套設備。
(4) 對于頂采光儀器要帶新的一次性PE手套對熒光PCR管封蓋,對于底采光儀
器要避免徒手或使用過的手套接觸熒光PCR管底相對開放,檢測過程中使用不帶熒光物質一次性乳膠手套推進高水平。
(5) 凍存試劑使用前應于室溫下*融化,瞬時離心使液體*沉于管底溝通機製。避免反復凍融好宣講, 以免影響試劑性能註入新的動力。
(6) 樣品、陽性對照等在使用后及時封蓋新產品,.避免組分間及氣溶膠等的污染造成假陽性去完善。
(7) 擴增產物禁止開蓋,實驗產生的廢棄物應及時收集長遠所需,遠離PCR實驗室進行無害化處理求索。 【規(guī)格】50頭份/盒
【貯藏與有效期】試劑盒置-20°C以下避光保存,有效期12個月規模。
【批準文號】獸藥生字163668871
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