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豬瘟試劑盒

豬瘟試劑盒

更新時間:2024-03-07

產(chǎn)品型號:FT-ZWSJ

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:豬瘟試劑盒-核酸提取有關(guān)耗村確保潔凈系列、無DNase/RNase,提取過程盡量低溫深刻認識、快速推動並實現,完成后進(jìn)入 下一步實驗或凍保

FT-ZWSJ豬瘟試劑盒的詳細(xì)資料:

品牌風(fēng)途產(chǎn)地類別國產(chǎn)
應(yīng)用領(lǐng)域食品,農(nóng)業(yè)

  【獸藥名稱】

  通用名稱:豬瘟試劑盒

  漢語拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe

  英文名稱:African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit 商品名稱:無

  豬瘟試劑盒【主要成分與含量】試劑盒中含有如下組分:

試劑盒組分

含量

陽性對照

250μL/管×1管

 

陰性對照

250μL/管×1管

 

PCR反應(yīng)液

850μL/管×1管

 

萌混合液

150μL/管×1管

 

說明書

1份/盒

【作用與用途】 本試劑盒可用于血液、脾臟自動化裝置、肝臟、淋巴結(jié)、 樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測不斷創新。

扁桃體建立和完善、腎臟、肌肉規模、環(huán)境樣品等

  【用法與判定】

  1 用法

  1.1待檢樣品釆集穩定發展、保存及運輸

  1.1.1樣品釆集

  (1) 活豬樣品 無菌采集抗凝血或血清5mL

  (2) 病死豬剖檢樣品或屠宰場剖檢樣品 無菌采集死豬的牌、肺聯動、腎增持能力、扁桃體、淋巴結(jié)行業內卷、肌 肉等組織樣品追求卓越。2?8°C低溫運至實驗室用于檢測。

  (3) 病豬污染的周邊環(huán)境 采集與病豬相關(guān)場所的糞便參與能力、飼料合理需求、污水樣品。2?8C低溫運至 實驗室用于檢測充分發揮。

  1.1.2樣品保存 采集的樣品在2?8°C保存應(yīng)不超過24小時高質量,-70°C條件下保存,避免反復(fù)凍 融選擇適用。

  1.1.3樣品運輸泡沫箱加冰袋后密封進(jìn)行運輸管理。包裝和運輸應(yīng)符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村《高致病性動 物病原微生物菌(毒)種或者樣品運輸包裝規(guī)范》和交通運輸門關(guān)于危險品運輸管理的有關(guān)規(guī)定。

豬瘟試劑盒

  1.2樣品處理

  1.2.1血液樣品處理 抗凝血樣品置于離心管中業務指導,8000 r/min離心2分鐘取上層血漿基礎,編號待 檢。非抗凝血樣品置于離心管中還不大,待凝固后高產,8000 r/min離心2分鐘取200μL上層血清,編號待檢發揮作用。

  1.2.2組織樣品處理取適量脾臟良好、肝臟、淋巴結(jié)銘記囑托、扁桃體引領、肌肉等組織,置于研磨器或研磨 管中研磨示範,再加適量生理鹽水混勻應用前景,制成約10%的組織勻漿,8000 r/miii離心2分鐘運行好,取200μL上 清于RNase/DNase-free無菌離心管中首次,編號備用。

  1.2.3環(huán)境樣品處理

  1.2.3.1糞便、飼料樣品處理方法取適量的糞便增幅最大、飼料放入盛有PBS緩沖液的研磨管中研磨 混勻共享應用,制成約10%的勻漿液.8000 r/min離心2分鐘,取200μL上清于RNase^DNase-free無菌離心 管中標準,編號備用示範推廣。

  1.2.3.2污水樣品處理方法 直接取200μL污水進(jìn)行核酸提取。

  1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法進(jìn)行DNA核酸提取即將展開。

  1.4熒光PCR反應(yīng):

  1.4.1從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液大幅增加、酶混合液,室溫融化后傳承,2000 r/min離心5秒交流研討。設(shè)被 檢樣品、陽性對照和陰性對照總和為n,則反應(yīng)體系配制如下:

  試劑 體系

  PCR 反應(yīng)液 17× (n+1) μL

  酶混合液 3× (n+1) μL

  1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml離心管中加入上述試劑形式,充分混勻后瞬時離心建設應用。按照20μL/ 管分裝量將試劑分裝至熒光PCR反應(yīng)管。

  1.4.3在上述制備好的熒光PCR反應(yīng)管中分別加入陰性對照日漸深入、陽性對照各5μL動力、處理好的待測 核酸各5μL,終體積25μL/管,蓋好熒光PCR反應(yīng)管蓋互動式宣講,混勻后瞬時離心效高性,轉(zhuǎn)移到熒光PCR儀器 上。

  144將PCR反應(yīng)管放置在熒光PCR儀樣品槽中自動化,在熒光PCR儀上運行以下程序:

步驟

條件

循環(huán)數(shù)

UNG處理

50 ℃, 2分鐘

1

預(yù)變性

95 ℃, 3分鐘

1

預(yù)擴(kuò)增

95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒

 

5

PCR擴(kuò)増

95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒

 

40

  熒光通道選擇FAM,在PCR擴(kuò)增階段每個循環(huán)的55C時采集熒光信號提升。設(shè)置擴(kuò)增體系為25卩I, 同時要選擇passive reference和quencher為none的模式。(注:若熒光PCR儀(如AB17500)按說明 書中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時間短無法運行不折不扣,可將預(yù)擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增條件變更為95C: 5秒 55°C: 30 秒)

  2結(jié)果判定

  2.1試驗有效性判定

  陽性對照有典型擴(kuò)增曲線且Ct值W30.且陰性對照無Cl值或無擴(kuò)增曲線支撐能力,線形為直線或輕微 斜線,無指數(shù)增高效利用。則判試驗結(jié)果有效特征更加明顯。否則,此次試驗視為無效講理論。

  2.2樣品判定

  2.2.1陽性:樣本檢測結(jié)果Ct值W35且有明顯指數(shù)增的可能性,判定檢出非洲豬瘟病毒核酸。

  2.2.2可疑:樣本檢測結(jié)果Ct值在35?38范圍內(nèi)服務為一體。此時應(yīng)對樣本進(jìn)行重復(fù)檢測問題,如果重復(fù)實驗 結(jié)果Ct值仍在35?38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增.則判定為陽性進行培訓,否則為陰性發展機遇。

  2.2.3陰性:樣本檢測結(jié)果Ct值>38或無Cl值,判定未檢出非洲豬瘟病毒核酸。

  【注意事項】(1)實驗前請仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書服務體系,嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行,在操作過 程中對時間搶抓機遇、試劑體積等準(zhǔn)確控制可以獲得好的結(jié)果分析。

  (2) 實驗室應(yīng)嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)定分區(qū)管理,依照配液區(qū)-模板提取區(qū)-擴(kuò)增區(qū)-分析區(qū)順序 進(jìn)行基因檢測全面闡釋。各區(qū)間人員非常激烈、器材、試劑及空氣流向應(yīng)有嚴(yán)格要求引人註目。

  (3) 核酸提取有關(guān)耗村確保潔凈領域、無DNase/RNase,提取過程盡量低溫、快速好宣講,完成后進(jìn)入 下一步實驗或凍保註入新的動力。

  (4) 對于頂采光儀器要帶新的一次性PE手套對熒光PCR管封蓋,對于底采光儀

  器要避免徒手或使用過的手套接觸熒光PCR管底,檢測過程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套雙重提升。

  (5) 凍存試劑使用前應(yīng)于室溫下*融化,瞬時離心使液體*沉于管底事關全面。避免反復(fù)凍融表現明顯更佳, 以免影響試劑性能。

  (6) 樣品技術節能、陽性對照等在使用后及時封蓋指導,.避免組分間及氣溶膠等的污染造成假陽性。

  (7) 擴(kuò)增產(chǎn)物禁止開蓋國際要求,實驗產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時收集流動性,遠(yuǎn)離PCR實驗室進(jìn)行無害化處理。 【規(guī)格】50頭份/盒

  【貯藏與有效期】試劑盒置-20°C以下避光保存競爭激烈,有效期12個月追求卓越。

  【批準(zhǔn)文號】獸藥生字163668871

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